Nisu svi protozoe (protozoe), paraziti kod ljudi, uzročnici bolesti. Otkriti vrstu patogena i potvrditi kliničku dijagnozu bez metoda laboratorijske dijagnostike. Najjednostavniji koji se nastanio u ljudskom tijelu može biti u različitim fazama svog razvoja.
Proučavane su klase parazita i biomaterijali
Najjednostavniji su podijeljeni u 4 klase:
- Kornogawks (Rhizopoda) - zastupljeni su amebama kod ljudi;
- flagellata (flagellata) - glavni patološki predstavnik - Leishmania;
- cilijarni (ciliata) cilijati - najčešći uzročnik bolesti - balantidija;
- sporozoa (sporozoa) - opasan parazit ove skupine - Plasmodium malaria.
Kod encystiranja mikroorganizam dobiva zaobljeni oblik i prekriven je zaštitnim omotačem. U obliku cista, protozoe postaju manje osjetljive na nepovoljne okolišne čimbenike..
Lokalizacija patogenih mikroorganizama može biti u različitim organima i tkivnim strukturama. Stoga izbor materijala za proučavanje ovisi o tome gdje se parazit može nalaziti.
Sljedeće može biti predmet istrage:
- krv
- koštana srž;
- sadržaj apscesa (u jetri, plućima, mozgu);
- sadržaj šupljina (trbušne, pleuralne, perikardijalne);
- sluz;
- urina;
- cal;
- izlučevine sluzi i crijevima, fistule.
Imajte na umu: Postoji mnogo dijagnostičkih varijanti, a razmotrit ćemo tipove koji su najčešći u kliničkoj laboratorijskoj praksi..
Privatna dijagnostika
U svakom pojedinačnom slučaju, laboratorijski tehničar ima zadatak pronaći određeni patogen, a ponekad se i drugi otkriju duž glavnog puta..
Dijagnoza korijenskih noževa (ameba)
Postoji 6 vrsta tog mikroorganizma sposobnih za život u crijevu. Samo dizenterija ameba je klinički važna, nalazi se u vegetativnom obliku iu obliku cista..
Glavni način otkrivanja parazita je istraživanje prirodne (neliječene) biološke pripreme..
Osim toga, koriste se imunološke metode:
- neizravna imunofluorescencija;
- indirektna aglutinacija (RNA);
- radijalna imunodifuzija.
Imajte na umu: serološke metode su neinformativne i koriste se samo kao dopuna glavnom u sumnjivim slučajevima.
Dijagnostika cilijara (ciliates)
Patogeni oblik mikroorganizama ovog roda je balantidija. To je mikroorganizam koji uzrokuje balantidiazu - bolest praćena ulceroznim procesom debelog crijeva. Patogen se otkriva u prirodnom razmazu u obliku vegetativnog oblika i cista. Materijal za razmaz (feces i sluz) sakuplja se tijekom rektoromanoskopskog pregleda i posije se na posebne medije..
Preporuka za čitanje: Balantidiasis: simptomi, liječenje i prevencija
Dijagnoza flagelata (Leishmania, Giardia, Trypanosome, Trichomonas)
Za ljude, leishmania, tripanosome, Giardia, Trichomonas.
Leishmania - mikroorganizmi koji uzrokuju lišmanijazu ispitani su u razmazu krvi, materijalima koštane srži, struganjima kože. U nekim slučajevima, kada se dijagnosticira Leishmania, kultura se primjenjuje na medij kulture..
Preporučamo da pročitate: Leishmaniasis: uzroci, simptomi, dijagnoza, liječenje i prevencija
tripanosomskog - uzročnici bolesti spavanja (američko / afričko tripanosomijaza ili Chagasova bolest).
Afrička varijanta određena je u početnom razdoblju u istraživanju periferne krvi. Patološki mikroorganizmi s progresijom bolesti nalaze se u materijalu probijanja limfnih čvorova, u uznapredovalom stadiju - u cerebrospinalnoj tekućini.
Uzročnik američkog tripanosomijaza u akutnoj fazi bolesti može se naći u obliku flagelata. Nadalje, neobični paraziti nalaze se u mišićnim stanicama, miokardiju i neuronima središnjeg živčanog sustava..
Za dijagnozu tripanosoma za sumnju na Chagasovu bolest, ispitivani materijal ispituje se pod mikroskopom pri malom povećanju. U isto vrijeme mrlje i debeli kap pre-oslikane.
Giardia, vodeći parazitski način života u dvanaesniku se nalazi u žuči ili u analizi fecesa (cista).
Preporučujemo da pročitate: Giardiasis: simptomi, liječenje i dijagnoza
Trichomonas (intestinalni, oralni, vaginalni) otkriveni mikroskopijom materijala uzetih iz zahvaćenih sluznica.
Detekcija sporovika (Plasmodium malaria, uzročnik kokcidoze, itd.)
Sporoviki - parazitski oblici koji žive u stanicama, tkivima i tjelesnim šupljinama.
Najčešća i najopasnija vrsta za ljude je malarijski plazmodij, koji ima 4 glavne vrste patogena: uzročnik trodnevne malarije, četverodnevne malarije, tropske malarije i ovalne malarije..
Preporuči čitanje: Malarija: uzroci, simptomi, dijagnoza, liječenje i prevencija
Seksualni razvoj plazmodija (sporogony) odvija se u komarcima Anophelesa. Aseksualna (shizogonija tkiva i eritrocita) - u tkivu jetre i ljudskim eritrocitima. Ta obilježja životnog ciklusa moraju se uzeti u obzir pri dijagnosticiranju malarijskog plazmija..
Tako, kod novo bolesnog pacijenta, u krvi, može se detektirati zametne stanice ciklusa sporogonije. Ali u visini malarijskih napada u krvi u velikim količinama pojavljuju se shizonti.
Štoviše, različiti oblici plazmodija pojavljuju se u različitim fazama malarijske groznice:
- tijekom perioda hladnoće, krv je ispunjena merozoitima, tipom šizonta;
- prstenasti trofozoiti nakupljaju se u eritrocitima u visini temperature;
- smanjenje temperature karakterizira prevlast amoebnih trofozoita;
- tijekom razdoblja normalnog stanja, krv sadrži odrasle oblike shizonta.
Proučavanje uzročnika malarije (Plasmodium malaria) provodi se u razmazu i gustoj kapi.
Morfološki oblici parazita za jasnu diferencijaciju analizirani su specifičnim bojanjem. Ova opcija "vizualizacije" omogućuje vam da odredite pojedinačne morfološke značajke određene vrste mikroorganizama..
Imajte na umu: Dijagnoza malarije u proučavanju mrlja i debelih kapi krvi ponekad je pogrešna. U nekim slučajevima, krvni trombociti se mogu zamijeniti s patogenom malarije. Ponekad se simuliraju i fragmenti plazmodija leukocita i drugih stanica..
Osnovne metode istraživanja najjednostavnijih
Ukratko pregledajte najčešće metode istraživanja prisutnosti najjednostavnijih.
Dijagnostika najjednostavnije metode prirodnog razmaza i razmaza obojenog Lugolovom otopinom (u fecesu)
Lijek se priprema iz emulzije fecesa u izotoničnoj otopini. Dvije kapi natrijeva klora i otopina Lugola nanesene su na staklenu pločicu. Materijal za testiranje se dodaje u obje formulacije drvenim štapom i nakon što je prekriven staklom, oni se promatraju u različitim rezolucijama mikroskopa..
Prema određenim karakteristikama, zabilježene su protozoe. Za točnost pripremite 2-3 lijeka iz istog materijala. U sumnjivim slučajevima, analiza se ponavlja nekoliko puta tijekom 2-3 tjedna..
Metoda može otkriti vegetativne i cistične oblike:
- Giardia;
- Balantidium;
- disenterična ameba.
Uz patogene oblike utvrđuju se i nepatogene protozoe. Također u zdravih nositelja su luminalne i cistične forme..
Važno je: Istraživanja kako bi se izbjegle netočnosti i pogreške trebalo bi ponoviti.
Rezultat dijagnoze najjednostavnije metode nativnog i obojenog premaza treba sadržavati opis oblika patogena (luminal, cista, tkivo).
Zahtjevi istraživanja:
- materijal prikupljen za analizu (tekući izmet) ispituje se najkasnije 30 minuta nakon izlučivanja;
- ukrašena fecesa mora biti dijagnosticirana unutar 2 sata nakon izlučivanja;
- ne smiju biti prisutne nečistoće (dezinficijensi, voda, urin) u materijalu;
- za rad s materijalom koriste se samo drveni štapovi, stakleni nisu prikladni zbog klizanja sluzi;
- štapići trebaju biti spaljeni odmah nakon upotrebe..
Metoda očuvanja (fekalni pregled) u dijagnostici protozoa
Ispitivanje se provodi fiksiranjem protozoa s konzervansom. Ova se metoda razlikuje od prethodne u smislu da konzervansi omogućuju da lijek zadržite duže vrijeme.
Korišteni konzervansi:
- Barrow. Sadrži sastojke za očuvanje: 0,7 ml natrijevog klorida, 5 ml formalina, 12,5 ml 96% alkohola, 2 g fenola i 100 ml destilirane vode. Sastav bojanja: 0,01% otopina tionina (azura).
- Safarlievovo rješenje. Sastojci: 1,65 g cinkovog sulfata, 10 ml formalina, 2,5 g kristalnog fenola, 5 ml octene kiseline, 0,2 g metilen plave boje, 100 ml vode. Ovaj se konzervans koristi u slučajevima kada se materijal mora čuvati više od mjesec dana..
Prazne bočice pune se konzervansom, materijal se u njih prenosi u omjerima 3: 1, a zatim se po potrebi dodaje boja. Evaluacija rezultata dobivenih u istraživanju 2-3 lijeka.
Metoda obogaćivanja formalin-eter (analiza prisutnosti protozoa u fecesu)
Ova dijagnostička metoda omogućuje razdvajanje i koncentriranje jednostavnih cista. Za analizu su potrebni sljedeći sastojci: formalin (10 ml), 0,85 g izotonične otopine, destilirana voda, sumporni eter, Lugolova otopina..
Mješavina biomaterijala s navedenim tekućinama miješa se i centrifugira. Talog dobiven na dnu epruvete boji se Lugolovom otopinom i ispituje na prisutnost cista i vegetativnih oblika..
Leishmania metoda (razmaz koštane srži)
Za dijagnosticiranje lišmanijaze koriste se sljedeći reagensi: smjesa Nikiforov (sumporni eter i etilni alkohol), fosfatni pufer, Azur-eozin prema Romanovskom.
Tvar koštane srži vrlo je pažljivo postavljena na staklenu pločicu nakon posebne pripreme. Koristi se mikroskop s imerzijskim sustavom.
U akutnom razdoblju bolesti veliki broj leishmanija nalazi se u punktatu..
Imajte na umu: ponekad krvne stanice mogu nalikovati na obrađenu leishmaniju, tako da je vrlo važno da laboratorijski tehničar bude oprezan i ima dovoljno iskustva za samostalno istraživanje..
Metoda za otkrivanje leishmanije u razmazu od infiltracije kože
Potrebni reagensi slični su prethodnoj analizi..
Materijal za testiranje dobiva se iz postojećeg sadržaja tuberkuloze ili ulkusa. Grebanje za sumnju na lišmanijazu se obavlja vrlo pažljivo skalpelom, bez krvi. Zatim se priprema na staklu. Za točnost dobivenih rezultata istodobno se ispituje nekoliko lijekova..
Ako postoji bolest, određeni su makrofagi, fibroblasti, limfoidne stanice prisutne u ispitivanom materijalu i Leishmania.
Postupak izolacije čiste kulture leishmania dobiven struganjem patoloških tkiva
Ovom metodom dijagnosticiranja najjednostavnije struganje tkiva nalazi se u posebnom hranjivom mediju u kojem se odvija aktivna reprodukcija lišmanije..
Prije prikupljanja struganja, koža se temeljito tretira alkoholom, zatim se napravi rez od tuberkule, s dna kojega se sadržaj ukloni i stavi u epruvetu s medijem. Materijal se uzima nekoliko puta, nakon čega se stavlja u različite cijevi. Zatim u termostatu na temperaturi od 22-24 stupnja dolazi do uzgoja. Rezultati se procjenjuju pod mikroskopom. Ova se metoda koristi kada drugi, jeftiniji i brži načini dijagnosticiranja najjednostavnijih su neučinkoviti..
Da bi se vidjelo kako se u praksi dešifriraju testovi na prisutnost najjednostavnijih kapljica krvi, možete, nakon gledanja video pregleda:
Lotin Alexander, liječnik